Detection of serum and salivary IgE and IgG1 immunoglobulins specific for diagnosis of food allergy. Fecha: Lunes 10 de junio
Detection of serum and salivary IgE and IgG1 immunoglobulins specific for diagnosis of food allergy.
Authors:
Nunes MPO1, van Tilburg MF1, Tramontina Florean EOP1, Guedes MIF1.
1 Laboratory of Biotechnology and Molecular Biology, State University of Ceará, Fortaleza, Ceará, Brazil.Abstract:
Given the growing incidence and prevalence of life-threatening food allergies, health concerns have raised new perspectives for in vivo and in vitro diagnostic methodologies, pointing to saliva as a promising material, already used to diagnose other pathologies. Based on the above considerations, this study aimed to verify the possible use of saliva for the detection of IgE and IgG1 in the diagnosis of food allergy. This was a randomized, cross-sectional clinical study with a quantitative approach, developed at a hospital referral center in allergy in the state of Ceará, from January to July 2015. The sample consisted of 36 children of both sexes, aged between 1 and 60 months, with a diagnosis of cow's milk protein allergy (CMPA) by the RAST test. Children hospitalized or under immunosuppressive drugs were excluded from the study. Serum and saliva samples of the participants were collected and subsequently subjected to the indirect immunoenzymatic assay (ELISA) for the detection of specific serum and salivary immunoglobulins for food: corn, papaya, cow's milk, egg white, wheat, soybeans, peanuts, nuts, kiwi, cacao, fish, shrimp, bananas and tomatoes. For comparison of serum and saliva results, the T-test of independent samples and Mann-Whitney were adopted, for samples with normal and non-normal distribution respectively. A confidence interval of 95% was adopted for significant results. It was observed that 100% (n = 36) of the participants presented cow's milk allergy through the indirect ELISA, detecting IgE or IgG1 in serum and saliva. When serum IgE and IgG1 concentrations were compared, there was no statistical difference (p > 0.05) in 12 of the 14 foods evaluated. The same amount (n = 12) of non-significant differences (p > 0.05) was observed in the comparison of the 14 foods under IgE and IgG1 contractions in saliva. In the verification of the average values of IgE present in the serum and saliva of the foods, only cow's milk, fish and papaya showed statistically significant differences (p < 0.05). Of the total food evaluated, only the average levels of IgG1 present in serum and saliva showed a significant value (p < 0.05) in banana and tomato. These findings indicate that the detection of IgE and IgG1 in saliva proves to be as efficient as in the serum. The use of the salivary technique for use in the diagnosis of food allergy is suggested.
DOI: 10.1371/journal.pone.0214745
Detección de inmunoglobulinas séricas y salivales de IgE e IgG 1 específicas para el diagnóstico de alergia alimentaria.
ResponderEliminarIntroducción
La alergia alimentaria (FA por sus siglas en ingles: food allergy) es un efecto adverso para la salud debido a una respuesta inmune que ocurre de manera reproducible después de la exposición a un alimento determinado.
Además de la existencia de pruebas de diagnóstico a través de la detección de IgE, también se están estudiando otras inmunoglobulinas para este propósito. Los paneles de IgG 1 e IgG 4 específicos de antígeno alimentario se han mensionado como una posible alternativa para el diagnóstico de FA, pero en la actualidad solo la IgG 1 se destaca aún más por el hecho de que la IgG 4 no tiene receptores específicos en las células, lo que evita la formación de la reacción clínica de la hipersensibilidad a los alimentos
Entre las muestras investigadas para su uso en el diagnóstico de FA, la saliva ha sido señalada por investigadores, debido a la presencia significativa de inmunoglobulinas secretoras del tipo IgA, IgG e IgM y ya se han utilizado para el diagnóstico de VIH ( virus de inmunodeficiencia humana), cáncer, tuberculosis e infección por Helicobacter Pylori.
Este estudio tuvo como objetivo verificar la posibilidad de usar saliva para detectar IgG 1 para el diagnóstico de alergia alimentaria.
Materiales y métodos
Este es un estudio de casos y controles, abordaje transversal y cuantitativo, con la recopilación de datos en la clínica ambulatoria de alergia alimentaria de un Hospital de Niños de referencia en Fortaleza/CE y análisis en el Laboratorio de Biología Molecular de la Universidad Estatal de Ceará en Brasil.
El estudio incluyó muestras de suero y saliva de 36 niños de 0 a 5 años de edad, que asistieron a la clínica ambulatoria de alergia alimentaria, diagnosticados con alergia a la proteína de la leche de vaca (APLV) por el gastro-pediatra a través de RAST y anamnesis. Los niños hospitalizados o que tomaban medicamentos inmunosupresores fueron excluidos del estudio.
Para el grupo de control del estudio, se recolectó sangre y saliva de niños sanos bajo atención pediátrica ambulatoria de rutina.
La prueba ELISA se realizó en 56 niños para investigar la presencia de IgE e IgG 1 en muestras de suero y saliva, en primer lugar, contra las proteínas de la leche de vaca y posteriormente los otros 13 alimentos, con un total de 14 alimentos estudiados. Para cada alimento, se utilizaron 4 placas, divididas en IgE en saliva, IgE en suero, IgG1 en saliva e IgG1 en suero.
La saliva total se recolectó en la mañana, no requiriendo ayuno, a través de un hisopo para recolectar saliva (salivette), que se colocó en un tubo de polipropileno y se mantuvo en hielo.
Los extractos de alimentos se obtuvieron de alimentos frescos. El punto de corte se estableció como tres veces la desviación estándar de la media de los negativos.
Los resultados fueron considerados significativos con valores de p <0.05 con un intervalo de confianza del 95%.
Resultados
ResponderEliminarLa prueba ELISA mostró un nivel de 100% tanto en especificidad como en sensibilidad en comparación con la prueba RAST.
EN los niños con APLV s evaluó la prevalencia de sensibilización a otros alimentos, encontrando una mayor prevalencia a camarones, seguido de trigo, clara de huevo, soja, café, maní, maíz, plátano, papaya, tomate, kiwi y cacao. 100 % tenian sensibilización a pesacado. El grupo de proteínas animales fue el más sensible en comparación con los otros grupos.
Cuando se compararon las medias de las concentraciones de IgE e IgG 1 en suero, todos los alimentos no tuvieron diferencia estadística (p> 0.05), excepto la leche de vaca y el pescado (p <0.001; p <0.010), respectivamente. En la saliva, todos los alimentos no tuvieron diferencias estadísticas (p> 0.05), excepto la leche de vaca y el tomate, que presentaron una diferencia (p <0.001, p <0.003)
La media de la concentración de IgE para leche de vaca y papaya en suero fue significativamente más baja que en la Saliva (p <0.05). Además, la media de la concentración de IgE contra el pescado y el maíz en suero fue significativamente mayor que en saliva (p <0,05).
La concentración media de IgG 1 en leche de vaca, pescado, camarones, huevo, soja, trigo, café, maní, kiwi, papaya, plátano, maíz y cacao no difirió significativamente entre suero y saliva (p> 0, 05). Pero la concentración media de IgG 1 del tomate en el suero fue significativamente menor que en la saliva (p <0,05).
Discusión
ResponderEliminarSe resalta a este artículo el primer trabajo que informa sobre la posibilidad de un diagnóstico no invasivo para la alergia alimentaria. Además, la interacción de las proteínas alergénicas con el suero y la saliva se puede observar al detectar tanto la IgE como la IgG 1 .
Las teorías principales sobre la sensibilización a pescado en la población estudiada son la sensibilización en el útero o la exposición en el hogar a través de rutas no orales, dado que no es un alimento de frecuente consumo en lactantes.
Estos resultados demostraron que, al comparar los niveles de inmunoglobulinas específicas de IgE e IgG 1 en el suero y la saliva de los alimentos analizados, no se encuentra una diferencia estadística entre ellos para la mayoría de los alimentos.
Aunque la IgE es la inmunoglobulina identificada como el mediador de las reacciones alérgicas a los alimentos, varias evidencias muestran que la inmunoglobulina IgG también puede inducir la anafilaxia sistémica. Los mastocitos pueden responder tanto a los anticuerpos IgE como a los anticuerpos IgG. Los anticuerpos IgG en la FA pueden influir en la formación de inmunocomplejos que contradicen el concepto tradicional de que estos anticuerpos inhiben los procesos alérgicos. Debido a la gran diversidad de alimentos alergénicos, se cree que las reacciones inmunológicas pueden ser muy diferentes y que sus mecanismos pueden funcionar de una manera más complicada, lo que requiere estudios adicionales.
Los resultados de detección de IgG 1 específicos de alérgenos que se muestran en este estudio son relevantes, ya que muestran la detección de IgE e IgG 1 específica para diferentes alimentos estudiados en suero y saliva. Además, este resultado muestra que la saliva se puede utilizar para diagnosticar FA.
Se ha informado que las reacciones mediadas por IgG tienen una respuesta más lenta después de la exposición al antígeno.
Fue posible verificar con este estudio la similitud en la especificidad y la sensibilidad de la prueba ELISA, utilizando tanto suero como saliva para la detección de IgE e IgG 1 para la prueba RAST.
En este contexto, se encontró que el uso de saliva para la detección de IgE es más sensible para diagnosticar CMPA solo porque tiene una cantidad mayor, sin embargo, IgG 1 también mostró eficiencia en el diagnóstico de alergia a los alimentos a través de la saliva.
El estudio sugiere la detección salival combinado con el método para diagnosticar la alergia a los alimentos, midiendo la IgE y la IgG 1 para obtener resultados más confiables, así como para investigar las alergias mediadas, sin IgE y mixtas.